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VERSA™ 110 PCR工作站的热启动PCR 应用

VERSA™ 110 PCR工作站的热启动PCR 应用

 

PCR是一种高度敏感的技术,使研究人员能够从非相关序列的背景中快速选择和扩增特定的靶序列。然而,如果所有反应组分在室温下同时结合,则碎片之间可能发生非特异性退火。这种过早的错误启动事件可能会放大非特异性的DNA序列,特别是当目标序列以低拷贝数存在时。当重新进行PCR检测以检查可疑结果时,浪费了时间、金钱和资源。

一种解决方案是使用VERSA110 PCR构建工作站进行“热启动”PCR。此方法要求排除一个或多个基本反应组分,直到反应温度超过目标引物的退火温度。这个程序的一个变体是用石蜡珠包埋省略的PCR试剂。在热循环之前,手动将珠添加到PCR板中,然后添加剩余试剂。一旦接触到足够的热量,蜡就会融化,释放出截留的试剂,使反应正常进行。冷却板使石蜡上升到表面并凝固,将反应液困在蜡盖下面。然后必须刺穿盖子,以便取出样品。