NaV1.7调节剂HTS分析
Cellular HTS Assays for Pharmacological Characterization of NaV1.7 Modulators
在药物发现过程的早期阶段离子通道是具有挑战性的药物靶点,特别是因为缺乏在功能相关分析中筛选大量化合物的技术。电生理膜片钳技术是研究离子通道的金标准,但其通量较低,不适合筛选大量的化合物。然而,对于针对离子通道目标的化合物的随机高通量筛选(HTS),在过去几年中已经有许多功能细胞分析可用。这里我们使用稳定表达钠通道NaV1.7的HEK-293细胞,并比较了三种HTS分析方法——离子流分析、荧光成像平板阅读器(FLIPR™, Molecular Devices, Sunnyvale, CA)膜电位分析,以及基于荧光共振能量转移(FRET)的膜电位分析到自动电生理分析(Ionworks™ HT[分子器件]平台),研究11种已知Nav1.7抑制剂。我们的结果表明,所有三种HTS分析都适用于NaV1.7抑制剂的鉴定,但作为HTS分析,离子流分析比基于FLIPR和FRET的膜电位分析更稳健,Z′值更高。此外,IonWorks试验和离子流试验在Nav1.7抑制剂的效力之间有更好的相关性。本文描述了目前可用于研究电压门控Nav1.7的所有HTS试验之间的比较,结果表明,离子流试验在开始Nav1.7药物开发初期时更适合作为初步HTS试验。
仪器方法:离子通道阅读器ICR 8100/ICR 12000