KCNQ2钾通道的中通量功能分析
KCNQ2(Kv7.2)的异源表达导致了一个缓慢激活、非失活、电压门控钾通道的形成。利用稳定表达KCNQ2的细胞系，我们开发了一种铷通量测定方法来测量该离子通道的功能活性和药理调节。铷通量采用96孔板进行；对铷进行定量，使其每天能够筛选1000个数据点。细胞在37℃和t1/2=40min下以单指数方式积累铷。用细胞外钾升高处理细胞可通过KCNQ2刺激铷外流。铷流出率随细胞外钾含量的增加而增加：50mM钾含量时的t1/2=5.1min。抗惊厥药物瑞替加滨(EC50=0.5 μM)增强钾刺激外排。钾诱导和瑞加滨促进的外排均被TEA阻断,(IC50s=分别为0.4和0.3mM),神经递质释放增强子和假定的认知增强子利诺吡啶(IC50s分别为2.3和7.1μM)和XE991(IC50s分别为0.3和0.9μM)。筛选一系列离子通道调节剂从而发现抑制剂，包括氯丝菌(IC50=27 μM)。这些研究扩展了KCNQ2的药理特性，并证明了使用该检测系统快速筛选调节KCNQ2功能的化合物的可行性。
仪器方法：离子通道阅读器ICR 8100/ICR 12000
