使用VERSA液-液萃取（LLE）工作站从全血或加标生物细胞材料（人工血）样品中自动液-液萃取25-羟基维生素D的验证及其LC/MS测定
简介：
维生素D对骨骼健康很重要，缺乏维生素D会导致骨质疏松、佝偻病、心血管疾病、糖尿病、自身免疫性疾病、抑郁、中风、慢性疼痛、骨关节炎和多种癌症。测定循环中25-羟基维生素D的水平对诊断人体肠道吸收不良和维生素D缺乏或中毒也很重要。研究表明，维生素D缺乏症普遍存在于普通人群中。这导致血清中25-羟基维生素D（也称为[25（OH）D]）的临床诊断试验呈指数级增长。然而，这种形式的维生素D在血液中的半衰期为4到6个小时，并且与血液循环中的一种运输蛋白紧密结合。因此，检测方法必须快速处理样品，并且必须能够从载体蛋白中去除25（OH）D。
有几种方法可以通过测量血清25-羟基维生素D来评估维生素D的充足性。由于有两种形式的维生素D有助于个人的整体状况（一种主要来源于皮肤产生的维生素D，另一种来源于饮食或补充剂），重要的是，这两种形式的衡量是平等的。抗体（ELISA）或其他蛋白质结合分析是可用的，但能力验证和比较研究提出了问题，大多数现有分析的能力，以准确地测量不同形式的25（OH）D，并通过扩展，总维生素D值，这些分析报告。一些较大的实验室已经开发了使用LC-MS/MS串联质谱或HPLC的分析方法。然而，用于此类分析的手动样品制备方法非常繁琐。研究表明，25（OH）D的液-液萃取是常见免疫维生素D萃取方法的一种经济有效的选择（Højskov等人，2010）。
Aurora的VERSA LLE工作站已通过液-液萃取（分配色谱法）从血清中有机溶剂萃取25-羟基维生素D的验证。验证数据见本技术说明。
结果：
来自该装置的峰高数据的可靠再现性表明，在可接受的值内，使用这种自动化可以有效地提取25（OH）D等生物分子。此外，自动提取维生素D需要60分钟，一组96个样品没有检测到交叉污染。维生素D的提取过程比手工提取过程少了大约17分钟。
结论：
使用VERSA LLE工作站的自动化辅助维生素D提取过程被证明是分离此类化合物的笨重分离漏斗的成功替代。使用VERSA LLE工作站提取25-羟基维生素D只是Aurora提供的众多解决方案之一。许多液体处理应用程序已经实现自动化，每个VERSA工作站仍然可以定制，以满足独特的需求。
Aurora提供完整的实验室自动化解决方案，通过提供应用支持、试剂和仪器，支持生命科学、化学分析和药物发现研究，在提高质量、准确度和精密度的同时提供更高的通量。
Højskov，CS.，Heickendorff，L.和Holger J.，2010年。高通量液-液萃取和LCMSMS分析，用于在常规临床实验室测定循环25（OH）维生素D3和D2。临床医生学报。411(1-2): 114-116.
