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自动化固相萃取如何提高回收率?

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自动化固相萃取如何提高回收率?

固相萃取常见问题之回收率低

近年来,固相萃取技术得到快速发展,已广泛应用在食品安全、药品分析、环境检测等领域,凭借高效、可靠、试剂消耗少等优点成为样品前处理的有效手段。但是,用户在使用固相萃取时会遇到各种各样的问题,如回收率低。

固相萃取基本流程包括:活化(即柱子预处理)、上样、淋洗、洗脱及分析物收集。

当出现“目标物没有回收或回收率低”时,可向样品溶液中添加标液,再进行完整的SPE操作,将样品流出液、淋洗液和洗脱液分别收集并分析,以查找目标分析物在哪个环节流失了。目标化合物在吸附剂上保留不足;目标化合物未被完全洗脱;其他环节。

图一:回收率低

1、目标化合物在过SPE柱时未全部保留在萃取柱上,与样液一起流出萃取柱:

具体原因

解决方法

SPE柱选择不合适

选择对目标物有合适保留强度的SPE

② 样品溶剂和淋洗液的洗脱梯度过强

降低样品溶剂淋洗液的洗脱强度

③ 样品溶液体积或浓度过高,发生“穿透”

降低上样量或增加分离柱填充料量

SPE柱未进行有效的预处理

加入溶剂进行活化和平衡

2、目标化合物未被完全洗脱,仍保留在萃取柱上:

具体原因

解决方法

① 分离柱对化合物保留过强,未找到合适的洗脱溶剂

选择对目标物有合适保留强度的SPE

② 洗脱液洗脱强度不够

提高洗脱液的洗脱强度

③ 洗脱液体积小

增加洗脱液体积

3、其他操作环节:

具体原因

解决方法

SPE前的提取效率不足

选择合适的提取溶剂

② 前处理步骤太繁琐,目标化合物损失

适当简化前处理步豫

③ 目标物挥发性太强,在浓缩步骤损失

调整浓缩方式

④ 目标化合物在前处理溶剂中分解

掌握目标化合物的稳定性,调整溶剂体系

自动化固相萃取工作站

AURORA VERSA固相萃取工作站配置特有的试剂喷加器和试剂冷槽,前者适用体积液体快速精准添加,后者在萃取过程中有效保存样品和试剂,有效防止挥发性溶剂;保护实验室环境和人员安全。VERSA固相萃取工作站,最大可达15个盘面,达到高通量全自动化萃取需求。液体处理工作站在血液/血清维生素D分离纯化、法医药物滥用研究、药物组分研究、尿液异黄酮分离纯化、食品安全等方面均有成熟运用。

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